定 价:42 元
丛书名:普通高等教育“十三五”规划教材
- 作者:丁益, 华子春主编
- 出版时间:2015/6/1
- ISBN:9787030449238
- 出 版 社:科学出版社
适用读者:本书适用于高等院校生命科学、生物技术类本科生及研究生的实验教学, 并可应用于生物制药、食品、药品、医学、临床检验、环境监测等学科的本科生及研究生进行实验教学, 也可作为相关生物制药企业等社会研究和应用部门的实验技术参考书
- 中图法分类:Q503-33
- 页码:231
- 纸张:胶版纸
- 版次:1
- 开本:16K
- 字数:(单位:千字)
本书的主要内容是介绍蛋白质等生物分子的分离纯化和分析鉴定方面的实验技术, 涵盖了当前在蛋白质化学、蛋白质组学及生物工程下游技术中所应用到的绝大多数层析、电泳等实验方法。书中步骤描述具体细致、实验过程系统完整, 全书图文并举、数据详尽具有较强的指导性和可操作性。生命科学类的学生通过本教材与实验课的学习, 能够了解和掌握当前在生命科学研究、应用和生产领域内对天然以及基因重组生物分子的分离、纯化、制备、分析、鉴定、数据处理等多方面的生化分析技术方法、实验原理、实验设计、操作技术以及相关仪器的使用。书中的基础实验部分、提高实验部分及综合实验部分可针对研究生和本科生的教学需要进行选择教学。
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目录
前言
基础实验部分
实验1 紫外分光光度法(测定蛋白质吸收光谱曲线及含量) 2
实验2 荧光光度测定法(测定核黄素含量) 5
实验3 离子交换柱层析(分离氨基酸) 8
实验4 凝胶层析(分离蛋白质及相对分子质量测定) 13
实验5 DEAEG纤维素梯度洗脱柱层析 18
实验6 疏水层析 23
实验7 亲和层析分离纯化胰蛋白酶(环氧氯丙烷活化法) 27
实验8 亲和层析分离纯化胰蛋白酶抑制剂(溴化氰活化法) 32
实验9 金属螯合柱层析 38
实验10 反相层析 42
实验11 聚焦层析 46
实验12 吸附层析(羟基磷灰石柱层析分离纯化DNA) 53
实验13 单向火箭免疫电泳 58
实验14 聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳和圆盘电泳 61
实验15 SDSG聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳(不连续体系) 69
实验16 SDSG聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳(连续体系) 75
实验17 Tricine-SDSG聚丙烯酰胺凝胶电泳(分离小分子多肽) 79
实验18 管式凝胶等电聚焦 85
实验19 水平平板凝胶等电聚焦 91
实验20 U形管密度梯度等电聚焦 98
实验21 潜水式琼脂糖凝胶电泳 101
实验22 梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳 106
实验23 印迹转移电泳 113
实验24 酶联免疫吸附测定 120
综合实验部分
实验25 蔗糖酶的综合分离纯化及其性质鉴定 128
实验26 人绒毛膜促性腺激素的综合分离纯化及其性质鉴定 139
实验27 α-淀粉酶的综合分离纯化及其性质鉴定 143
实验28 亲和层析分离纯化尿激酶及其性质鉴定(溴化氰活化法) 149
实验29 双向电泳(双向电泳比较FADD和FADD-/-细胞株的蛋白质表达差异) 156
实验30 脉冲场凝胶电泳 171
实验31 毛细管电泳 183
实验32 基因融合蛋白质的纯化 191
附录
附录A 聚丙烯酰胺凝胶电泳的蛋白质银染色法 200
附录B 常用缓冲液的配制方法 202
附录C 常用数据 210
参考文献 232
《生物化学分析技术实验教程》:
实验目的与要求
(1)了解紫外-可见分光光度计的测定原理和使用方法。
(2)学习和掌握紫外吸收光谱曲线的制作方法。
(3)学习和掌握蛋白质的定性?定量测定方法。
实验原理
蛋白质所含有的一些芳香族氨基酸(如酪氨酸?色氨酸?苯丙氨酸)具有共轭双键结构能够产生π→π﹡ 及n→π﹡ 类型的电子跃迁,因此能够在近紫外光区产生光吸收,并且在280nm波长处有一特征吸收峰。利用这一特性,通过对蛋白质紫外吸收光谱曲线的测定,可以进行辅助定性分析。根据Beer定律,当光径一定时,蛋白质溶液在280nm波长处的光吸收,在一定范围内与其浓度呈正比关系,可以进行定量测定。
实验仪器与器材
1. 实验仪器
紫外-可见分光光度计;混合器;电子天平。